1
Hvad viser farveintensiteten af et dot på membranen?
Mængden af antigen/protein.
Hvad er den største fordel ved dot-blot?
Metoden er hurtig, simpel og kræver ikke avanceret udstyr.
Hvad er det første trin i et Western blot?
Separation af proteiner ved SDS-PAGE.
Hvilken metode giver information om proteiners størrelse – dot-blot eller Western blot?
Western blot.
Hvilken metode bruges mindst i dag?
Dot-blot.
Hvor store prøvevolumener anvendes typisk ved dot-blot?
1–5 µL.
Hvorfor anvendes indirekte detektion oftest?
Fordi signalet bliver stærkere og detektionsgrænsen lavere.
Hvad binder et sekundært antistof til?
Det primære antistof.
Hvilke to enzymer anvendes i ca. 95 % af alle immunodetektioner?
Horseradish peroxidase (HRP) og alkalisk phosphatase (AP).
Hvordan vandrer store proteiner i SDS-PAGE sammenlignet med små?
Store proteiner vandrer kortere end små proteiner.
Hvilken retning bevæger proteinerne sig under blotting?
Mod den positive elektrode.
Hvad giver Western blot ekstra information om sammenlignet med dot-blot?
Proteinets størrelse.
Hvad sker der med bølgelængden, når et fluorokrom udsender lys?
Den bliver længere end aktiveringslysets bølgelængde.
Hvad er et fluorokrom?
Et molekyle der udsender lys efter aktivering med lys.
Hvad betyder det, at et antistof er konjugeret?
At det er koblet til fx et enzym eller fluorokrom.