Restriktionsenzyme
Restriktionsenzyme sind Kohlenhydrate. Wahr oder falsch? Bei falscher Antworte, bitte den Satz korrigieren
Falsch, Proteine
Wofür steht PCR
Polymerase chain reaction / Polymerase Ketten Reaktion
Welche Ladung hat die DNA und warum?
Negative Phosphatgruppen
Wie wird die klassische Sequenzierung auch genannt?
Sanger Methode
Nenne zwei mögliche Anwendungsbereiche der Gentechnik
Humaninsulinherstellung, SARS-CoV-2 Testung
Woher wissen Restriktionsenzyme wo sie schneiden sollen?
Sequenzspezifisches aktives Zentrum
Nenne die drei Phasen der PCR
Denaturation/Denaturierung, Annealing/Primer-Anlagerung, Extension/Verlängerunh
Erkläre wieso sich die DNA im Gel bewegt
Die negativ geladene DNA wird bei der Erzeugung des elektrischen Feldes vom negativen Pol abgestoßen und vom positiven Pol angezogen
Welche vier Stopp-Nukleotide gibt es und wie werden sie verteilt?
Jedes Becherglas/jede Reaktion bekommt eins von ddATP, ddTTP, ddCTP, ddGTP
Wie wird bei der qPCR DNA gleichzeitig vervielfältigt und erkannt/gemessen
Quantitätsabhängige Fluoreszenz
Es gibt zwei Arten von Restriktionsenzymen. Wie unterscheiden sie sich?
Blunt ends vs sticky ends
Wieso kann man bestimmte (einzelne) Gene mithilfe der PCR replizieren
Spezifische Primer legen Startpunkt fest
Warum bewegen sich kleinere DNA- Fragmente weiter als größere DNA-Fragmente?
Poren im Agarose-Gel
Wie hilft einem die Gelelektrophorese bei der Auswertung der Sequenzierung.
Ablesen des komplememtären Strangs von unten nach oben, da einzelne Basenpaarlängen unterschieden werden können
Nenne zwei Methoden der qPCR
SYBR Green I und TaqMan
Welche zwei Bindungen spalten Restriktionsenzyme in der DNA, um sticky ends zu erschaffen?
Wasserstoffbrückenbindungen und Phosphodiesterbindungen
Wie verhält sich das mathematische Wachstum eines Gens in der PCR?
Exponentiell, aber dann begrenzt
Was ist die Bedeutung der DNA-Leiter?
Referenzmuster für Basenpaarlänge
Wieso nennt man die Sequenzierung auch Kettenabbruchmethode
Die DNA-Stränge werden an allen Stellen abgebrochen und besitzen eine unterschiedliche Länge
Erkläre die bakterielle Transformation
Aufnahme extrazellulärer DNA von Bakterien und Intetration in das eigene Genom
Restriktionsenzyme können genutzt werden, um rekombinante Plasmide herzustellen. Wie kann man überprüfen, ob das Plasmid eingebaut wurde?
Selektion über Antibiotikaresistenzgene
Erkläre die Bedeutung der Taq-Polymerase für die PCR
Hitzeresistenz erlaubt den Einsatz im Thermocycler
Werte die Gelelektrophorese aus.
Auf welcher molekularbiologischen Grundlage beruht die Sequenzierung nach Sanger
Die Eigenschaft der ddNTPs. Durch die fehlen Hydroxylgruppe am 3` Ende des Zuckers kann keine weitere Phosphodiesterbindung mit dem nächsten Nukleotid aufgebaut werden. Die Replikation des Strangs stoppt an der Stelle
Erläutere kurz den Prozess wie Humaninsulin gentechnisch hergestellt werden kann.
Tipp: Schritt 1 ist die Isolation des Plasmids und des Humaninsulintens
1. Schneiden mit Restriktionsenzymen
2. Erstellung des rekombinanten Plasmids
3. Einbau des Plasmids in Bakterien
4. Selektion transgener Bakterien
5. Transgene Bakterien produzieren Insulin