Bases teóricas
¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe mejor el proceso de hibridación de ácidos nucleicos?
A) La unión específica entre una cadena de ADN y su complementaria mediante el apareamiento de bases nitrogenadas.
B) El proceso de recombinación genética en el que se intercambian segmentos de ADN entre dos moléculas.
C) La transcripción del ARN mensajero a partir de una secuencia de ADN en el núcleo celular.
D) La amplificación de secuencias de ADN.
A) La unión específica entre una cadena de ADN y su complementaria mediante el apareamiento de bases nitrogenadas.
¿Qué tipos de sondas podemos utilizar en la técnica de hibridación según su naturaleza?
a) Sondas de ADN
b) Sondas de ARN
c) Sondas químicas sintéticas
d) Todas ciertas
d) Todas ciertas
De forma genérica, durante la fase de prehibridación:
a) Se utiliza una solución de prehibridación para bloquear posibles uniones inespecíficas de la sonda.
b) Puede incluir distintas fases.
c) Incluye la preparación de la muestra y soporte.
d) Todas son ciertas.
d) Todas son ciertas.
La técnica de diagnóstico genético preimplantacional (DGP)...
a) Implica la hibridación genética para analizar los embriones antes de la implantación.
b) Detecta enfermedades monogénicas
c) Detecta enfermedades como: Síndrome de Klinefelter, Albinismo y Síndrome de
down.
d) Todas son correctas
d) Todas son correctas
¿Señala cuál de las siguientes afirmaciones puede ser una limitación de la técnica de microarrays?
a) La variabilidad técnica y la reproducibilidad pueden dificultar la comparación entre experimentos.
b) Ofrecen una medida estática de expresión génica, lo que puede no reflejar adecuadamente dinámica temporal.
c) Tienen un coste elevado y la interpretación de datos puede ser compleja y requerir experiencia.
d) Todas son ciertas
d) Todas son ciertas
¿Cómo se consigue la desnaturalización de la doble hélice de ADN?
a) Aumentando el pH.
b) Disminuyendo el pH.
c) Aumentando la temperatura.
d) A y C son correctas.
d) A y C son correctas.
En relación con las sondas de ADN de síntesis química...
a) Tienen una alta sensibilidad
b) No requieren desnaturalización
c) Lo más habitual es que tengan una longitud mayor a 50 nucleótidos
d) Se sintetizan en sentido 5'---->3'
b) No requieren desnaturalización
¿Qué debo tener en cuenta durante la fase de hibridación para facilitar la formación y la estabilidad del híbrido?
a) Que la concentración de formamida sea alta
b) Que la concentración de cationes monovalentes sea alta
c) Que la temperatura del proceso no esté muy próxima a la temperatura de fusión del híbrido
d) Ninguna es correcta
b) Que la concentración de cationes monovalentes sea alta
¿Qué genotipo hace que las personas metabolicen lento la cafeína?
a) AC y CC
b) AA
c) ATA
d) GAT
a) AC y CC
¿Para cuál de los siguientes casos aplicarías la técnica de ASO DOT BLOT?
a) Detección de mutaciones implicadas en la generación de resistencias al tratamiento en cáncer de mama
b) Detección de alteraciones cromosómicas en un diagnóstico preimplantacional
c) Detección de mutación puntual en el gen que codifica la enzima responsable de la metabolización de la cafeína
d) Detección de mutaciones en el genoma causantes del cáncer de colon
c) Detección de mutación puntual en el gen que codifica la enzima responsable de la metabolización de la cafeína
¿Qué molécula de ADN tendrá mayor temperatura de fusión?
a) Una molécula poli-AT
b) Una molécula poli-GT
c) Una molécula con un 60% de pares GC y un 40% de pares AT
d) Una molécula con un 40% de pares GC y un 60% de pares AT
c) Una molécula con un 60% de pares GC y un 40% de pares AT
Cuando se utilizan sondas químicas sintéticas de ácidos nucleicos (PNA) los híbridos resultantes son más estables que los correspondientes híbridos ADN/ADN o ARN/ARN. ¿A qué se debe esta característica?
a) A que presentan una temperatura de fusión menor.
b) A su esqueleto de azúcar-fosfato.
c) A que al carecer de grupos fosfato, no tienen carga eléctrica.
d) Ninguna es cierta.
c) A que al carecer de grupos fosfato, no tienen carga eléctrica.
¿Cuál sería el orden de pasos a llevar a cabo en un ensayo de southern blot?
a) Purificación del ADN, electroforesis en gel, digestión enzimática, transferencia de ADN a la membrana, desnaturalización del ADN, hibridación y revelado.
b) Purificación del ADN, digestión enzimática, electroforesis en gel, desnaturalización del ADN, transferencia de ADN a la membrana, hibridación y revelado.
c) Digestión enzimática, electroforesis en gel, transferencia de ADN a la membrana, hibridación y revelado.
d) Purificación del ADN, digestión enzimática, electroforesis en gel, hibridación, transferencia del ADN a la membrana, revelado.
b) Purificación del ADN, digestión enzimática, electroforesis en gel, desnaturalización del ADN, transferencia de ADN a la membrana, hibridación y revelado.
¿Cuál es el siguiente paso en la técnica southern blotting tras obtener la muestra y el ADN ser extraído?:
a. Digestión del ADN.
b. Electroforesis del ADN en gel de agarosa.
c. Hibridación ADN.
d. Fijación del ADN en una membrana de nylon.
a. Digestión del ADN.
En el contexto del diagnóstico genético preimplantacional, la técnica de FISH requiere que los núcleos de los blastómeros se extiendan en un portaobjetos previamente desengrasado, con la precaución de eliminar por completo los restos de citoplasma que pueden quedar alrededor y conservar la integridad y la morfología del núcleo. ¿Cuál de los siguientes pasos no estaría incluido en el procedimiento que se llevaría a cabo a continuación?
a) Pretratamiento de la muestra con albúmina para evitar que el tejido se despegue.
b) La desnaturalización de la doble cadena de ADN de la muestra biológica y de las sondas.
c) Lavado para eliminar el exceso de sonda unido inespecíficamente y contratinción para facilitar la visualización.
d) La detección de las señales con microscopio de fluorescencia.
a) Pretratamiento de la muestra con albúmina para evitar que el tejido se despegue.
¿Cuáles de las siguientes afirmaciones son ciertas?
a) La temperatura de fusión durante la desnaturalización se ve influida por la composición de las bases mientras que en la de la renaturalización no.
b) La temperatura de fusión durante la renaturalización se ve influida por la concentración, pero no en la desnaturalización.
c) La longitud de la molécula no influye en la temperatura de fusión durante la desnaturalización.
d) A y B son ciertas.
d) A y B son ciertas.
Señala la asociación correcta:
a) Fósforo 32 -> Fluorocromo
b) Cinanina Cy3 -> Hapteno
c) Tritio -> Fluorocromo
d) Biotina -> Hapteno
d) Biotina -> Hapteno
Señala la respuesta correcta:
a) La técnica de northern blot no necesita digestión enzimática con enzimas de restricción.
b) Los geles de agarosa que se utilizan para la electroforesis en southern blot contienen formaldehído como sustancia desnaturalizante.
c) La técnica de northern blot no requiere de una desnaturalización previa a la transferencia del gel a la membrana.
d) A y C son correctas.
d) A y C son correctas.
¿Qué tipos de sondas utilizamos en la técnica FISH?
a) sondas de separación y sondas radioactivas
b) sondas específicas de locus y sondas centroméricas
c) sondas de captura y sondas de extensión
d) sondas WCP y sondas poli-T
b) sondas específicas de locus y sondas centroméricas
Se ha demostrado que la hibridación en medio líquido es útil en el diagnóstico de Mycobacterium tuberculosis. En el caso de que un paciente presente una infección causada por este microorganismo, la sonda marcada y los ácidos nucleicos bacterianos diana entrarán en contacto en solución. ¿Qué tipo de pretratamiento de la muestra es necesario para que esto suceda?
a) El ARN debe ser liberado de las células bacterianas.
b) Desnaturalización de ARN.
c) Fijación de la muestra utilizando la solución de Carnoy.
d) Ninguna de las anteriores.
a) El ARN debe ser liberado de las células bacterianas.
¿Por qué la absorbancia del ADN es mayor cuando se encuentra en forma monocatenaria?
A) Porque las bases nitrogenadas están más expuestas.
B) Porque hay menos interferencia por el apilamiento de bases.
C) Porque se forman enlaces débiles con el solvente.
D) Porque la molécula es más larga.
A) Porque las bases nitrogenadas están más expuestas.
¿Cuál de los siguientes elementos NO es necesario para llevar a cabo un marcaje terminal?
a) Didesoxinucleótido
b) Desoxinucleótido
c) Cadena molde
d) Enzima TdT
c) Cadena molde
¿Cuál es el primer paso en la técnica de Microarrays?
a) Marcaje de las sondas
b) Aplicación de las muestras al soporte
c) Lavado poshibridación
d) Marcaje de las muestras
d) Marcaje de las muestras
En el procedimiento de la hibridación en medio líquido NO es cierto que:
a) La detección se puede realizar mediante microscopía de fluorescencia o mediante
lectura en un fluorímetro.
b) En caso de obtener un resultado positivo, se realizan pruebas adicionales.
c) Se puede tomar una muestra de esputo, tejido pulmonar o líquido cefalorraquídeo.
d) La muestra no se debe procesar ya que se eliminarían microorganismos de interés.
d) La muestra no se debe procesar ya que se eliminarían microorganismos de interés.
El trastuzumab es un antitumoral que ha demostrado su eficacia contra tumores que presentaban sobreexpresión de HER2. A pesar de esto, existe un porcentaje de pacientes que no responde al tratamiento debido a que presentan resistencias primarias o secundarias al trastuzumab. Estas resistencias pueden estar provocadas por alteraciones en uno o varios genes que se pueden identificar mediante un microarray de expresión génica. ¿Cómo diseñarías el ensayo?
a) Marcaría las sondas con fluorocromos de distintos colores.
b) Marcaría el ADNc de las células sensibles y de las resistentes con distintos fluorocromos.
c) Marcaría las sondas con un único fluorocromo.
d) Marcaría el ARNm de las distintas poblaciones celulares con distintos fluorocromos.
b) Marcaría el ADNc de las células sensibles y de las resistentes con distintos fluorocromos.