Generalidades
¿Mediante qué proceso se obtienen las proteínas recombinates a partir de E. coli?
Fermentación
¿Qué concentraciones de glucosa y extracto de levadura se emplearon en el reactor?
10g/L
¿Cuáles fueron las condiciones de centrifugado del medio?
4000g durante 0.5 h
¿Qué pH arrojó una mayor solubilización?
8-12.5
¿Cuál es la pureza de la proteína r-hGH en la etapa después la cromatografía de intercambio iónico?
95%
¿Qué funciones tiene esta hormona?
Estimular el crecimiento, la reproducción celular y la regeneración
¿Qué cepa de E. coli fue empleada?
E. coli M15
¿Cómo se realizó la lisis celular?
presión a 18,000 psi
¿Qué concentración de urea fue la óptima?
2M
¿Cuál es la pureza final de la proteína r-hGH?
99%
¿Dónde se produce esta hormona de manera natural?
Glándula pituitaria
¿Cuáles fueron las condiciones de la fermentación?
pH 7, 37°C, aireación y una agitación constante de 400-900 rpm
¿Cómo fueron analizados los cuerpos de inclusión?
Gel de poliacrilamida SDS-PAGE al 15%, teñidos con azul de Coomassie.
¿Qué concentración de proteína se obtuvo con el uso de urea?
6mg//mL
De acuerdo a la pureza obtenida ¿La r-hGH es adecuada para el uso en humanos?
Cierto
¿Qué funciones secundarias tiene esta hormona?
Gestión de la glucosa y la grasa
¿A qué longitud de onda se midió la densidad óptica?
600nm
¿Qué pureza se obtuvo después de la lisis celular?
13%
¿Qué causó la desestabilización de los cuerpos de inclusión?
La distribución de cargas debido al pH alcalino
¿Qué tipo de columna fue empleada para la purificación?
DEAE-Sepharose
¿Con que otro nombre se le conoce a la hormona del crecimiento?
Somatotropina
¿Qué concentración de proteína se obtuvo?
1.6 g/L de r-hGH
¿Cuáles fueron los principales contaminantes encontrados?
Dímeros y multímeros de r-hGH
¿Qué porcentaje de dímeros se encontró?
5 al 8%
¿Cuál fue el rendimiento de la r-hGH replegada purificada a partir de los cuerpos de inclusión de E.Coli?
50%