Fundamento
Definición de fluorescencia
Fenómeno físico donde fluorocromos emiten luminiscencia al ser excitados por luz de una determinada
Menciona 1 molécula con fluorescencia natural y dónde se encuentra
Lipofuscina, presente en el fondo ocular
¿Qué es un fluorocromo?
Es una molecula con propiedades naturalmente fluorescentes con las que se tiñen las muestras a observar
Nombre completo de la doctora que imparte el laboratorio de microbiología
Angélica Godínez Oviedo
Definición de Excitación/Absorción y Emisión
Excitación/Absorción: intensidad de emisión fluorescente a diferentes longitudes de onda de excitación
Emisión: intensidad de fluorescencia de emisión a diferentes longitudes de onda cuando se excita con la longitud de onda de excitación máxima
¿Qué es la inmunofluorescencia secundaria?
Cuando una molécula no posee propiedades fluorescentes por si misma y debe conjugarse con un fluorocromo
Diferencias en sistema de iluminación convensional y de fluorescencia
El sistema de iluminación convencional del microscopio nos permite ver la muestra por transmisión
Por su parte, en el microscopio de fluorescencia la muestra la vemos por reflexión de la luz
Menciona 5 tipos de pruebas bioquímicas
TSI, LIA, citrato, urea, sim)
Pasos del funcionamiento del microscopio de fluorescencia
1. Fuente de excitación emite fotones
2. Haz de excitación llega al filtro de excitación
3. La luz filtrada impacta sobre el espejo dicroico y es reflectada hacia los objetivos
4. Al ser reflejada la muestra, los flourocromos emiten flourescencia, que al ser de una longitud de onda mayor a la presente en la fuente de excitación puede atravesar el espejo dicroico y dirigirse hacia el filtro de emisión
5. La flourescencia de la muestra filtrada choca contra un prisma que proyecta la luz hacia los sistemas de detección del microscopio haciendo posible su visualización
Menciona los dos tipos de inmunofluorescencia y en que consiste cada uno
Directa: anticuerpo primario marcado con fluorocromo que reacciona con el antígeno dentro de la muestra.
Indirecta: fluorocromo se conjuga con un anticuerpo secundario dirigido contra un anticuerpo primario.
Menciona 5 tipos de fluorocromos
Cascade blue
Fluoresceína (FITC)
Rodamina (TRITC)
Naranja de acridina
Yoduro de propidio
Proteína verde fluorescente (GFP)
Nombre completo de la norma de bioseguridad mexicana
NOM-087-ECOL-SSA1-2002