Dot Blot og Western Blot

1

100

Hvad viser farveintensiteten af et dot på membranen?

Mængden af antigen/protein.

200

Hvor store prøvevolumener anvendes typisk ved dot-blot?

1–5 µL.

300

Hvilken retning bevæger proteinerne sig under blotting?

Mod den positive elektrode.

2

100

Hvad er den største fordel ved dot-blot?

Metoden er hurtig, simpel og kræver ikke avanceret udstyr.

200

Hvorfor anvendes indirekte detektion oftest?

Fordi signalet bliver stærkere og detektionsgrænsen lavere.

300

Hvad giver Western blot ekstra information om sammenlignet med dot-blot?

Proteinets størrelse.

3

100

Hvad er det første trin i et Western blot?

Separation af proteiner ved SDS-PAGE.

200

Hvad binder et sekundært antistof til?

Det primære antistof.

300

Hvad sker der med bølgelængden, når et fluorokrom udsender lys?

Den bliver længere end aktiveringslysets bølgelængde.

4

100

Hvilken metode giver information om proteiners størrelse – dot-blot eller Western blot?

Western blot.

200

Hvilke to enzymer anvendes i ca. 95 % af alle immunodetektioner?

Horseradish peroxidase (HRP) og alkalisk phosphatase (AP).

300

Hvad er et fluorokrom?

Et molekyle der udsender lys efter aktivering med lys.

5

100

Hvilken metode bruges mindst i dag?

Dot-blot.

200

Hvordan vandrer store proteiner i SDS-PAGE sammenlignet med små?

Store proteiner vandrer kortere end små proteiner.

300

Hvad betyder det, at et antistof er konjugeret?

At det er koblet til fx et enzym eller fluorokrom.